一、研究背景

腫瘤免疫治療，尤其是針對(duì)PD-1/PD-L1的免疫檢查點(diǎn)抑制劑，已成為多種癌癥的標(biāo)準(zhǔn)治療手段。然而，免疫治療的響應(yīng)率仍然有限，僅約15%至25%的患者對(duì)治療有積極反應(yīng)。因此，深入理解免疫檢查點(diǎn)通路的調(diào)控機(jī)制，以及腫瘤代謝對(duì)免疫微環(huán)境的影響，對(duì)于提高免疫治療的療效至關(guān)重要。PD-L1作為免疫檢查點(diǎn)蛋白，其表達(dá)水平是預(yù)測(cè)PD-1/PD-L1抑制劑療效的關(guān)鍵生物標(biāo)志物。然而，約30%的PD-L1高表達(dá)黑色素瘤患者對(duì)免疫治療無(wú)響應(yīng)，提示 蛋白翻譯后修飾（PTMs） 可能影響PD-L1的功能穩(wěn)定性。在已知的PTMs（如磷酸化、泛素化）中， 琥珀?；⊿uccinylation） 作為新型代謝相關(guān)修飾，其作用機(jī)制尚未明確。

黑色素瘤作為一種惡性程度較高的皮膚腫瘤，對(duì)傳統(tǒng)的化療和放療不敏感。免疫治療在黑色素瘤的治療中展現(xiàn)出了顯著的優(yōu)勢(shì)，但仍面臨諸多挑戰(zhàn)。因此，深入研究黑色素瘤中腫瘤免疫逃逸的分子機(jī)制，尋找新的治療靶點(diǎn)，對(duì)于改善黑色素瘤患者的預(yù)后具有重要意義。不久前《Nature genetics》一篇文獻(xiàn)聚焦于 PD-L1 的琥珀?；揎椩诤谏亓隹鼓[瘤免疫反應(yīng)中的作用，為黑色素瘤的免疫治療提供了新的思路和潛在靶點(diǎn)。

二、研究方法及相關(guān)發(fā)現(xiàn)

線粒體代謝與抗腫瘤免疫

研究者分析了接受免疫治療的黑色素瘤患者的蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)三羧酸循環(huán)（TCA cycle）和氧化磷酸化（OXPHOS）途徑的高表達(dá)與更好的預(yù)后和免疫治療反應(yīng)相關(guān)。這些途徑中的關(guān)鍵酶（如OGDH、SCS和SDH）在免疫治療反應(yīng)者中表達(dá)豐富，且與更好的預(yù)后相關(guān)。

在小鼠模型中，研究者發(fā)現(xiàn)，給予琥珀酸（DES）和α-酮戊二酸（DMK）處理可以顯著抑制黑色素瘤、結(jié)腸癌和肺癌的腫瘤生長(zhǎng)，并延長(zhǎng)生存期。這種效應(yīng)主要依賴于CD8+ T細(xì)胞的激活，而與巨噬細(xì)胞的極化無(wú)關(guān)。

琥珀酰輔酶A（Succinyl-CoA）的作用

研究進(jìn)一步揭示了琥珀酰輔酶A（Succinyl-CoA）在抗腫瘤免疫中的關(guān)鍵作用。Succinyl-CoA通過(guò)琥珀?；揎桺D-L1，促進(jìn)其降解，從而增強(qiáng)CD8+ T細(xì)胞的活性。實(shí)驗(yàn)顯示，Succinyl-CoA水平的升高與PD-L1的琥珀?；徒到獬收嚓P(guān)。

CPT1A作為琥珀酰轉(zhuǎn)移酶的作用

研究者發(fā)現(xiàn)，CPT1A（肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1A）是一種琥珀酰轉(zhuǎn)移酶，能夠調(diào)節(jié)PD-L1的琥珀?；?。CPT1A的激活可以通過(guò)琥珀?；揎桺D-L1，促進(jìn)其降解，從而增強(qiáng)抗腫瘤免疫。此外，CPT1A的表達(dá)水平與PD-1單克隆抗體的療效呈負(fù)相關(guān)，表明其可能作為預(yù)測(cè)免疫治療反應(yīng)的生物標(biāo)志物。

三、探索 PD-L1 琥珀?；年P(guān)鍵發(fā)現(xiàn)

精準(zhǔn)定位琥珀?；稽c(diǎn)

研究團(tuán)隊(duì)運(yùn)用高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，剖析黑色素瘤細(xì)胞系中的 PD-L1，識(shí)別出多個(gè)琥珀?；稽c(diǎn)，其中胞內(nèi)段賴氨酸殘基 K162 尤為關(guān)鍵。為驗(yàn)證，構(gòu)建不同琥珀酰化位點(diǎn)突變體，將野生型與突變型 PD-L1 分別轉(zhuǎn)染至黑色素瘤細(xì)胞，通過(guò)免疫印跡及琥珀?；禺愋钥贵w檢測(cè)，明確僅野生型可發(fā)生琥珀酰化，為后續(xù)研究奠定基礎(chǔ)。

琥珀?；鰪?qiáng) PD-L1 穩(wěn)定性

為探究影響，研究人員用蛋白質(zhì)合成抑制劑環(huán)己酰亞胺（CHX）處理細(xì)胞，不同時(shí)間點(diǎn)收集裂解液檢測(cè) PD-L1 表達(dá)。結(jié)果表明，野生型 PD-L1 在 CHX 處理后降解慢，證實(shí)琥珀?；鰪?qiáng)其穩(wěn)定性。深入研究發(fā)現(xiàn)，琥珀酰化的 PD-L1 能招募 E3 泛素連接酶 ITCH，ITCH 與 PD-L1 結(jié)合阻斷泛素化降解途徑，延長(zhǎng)其半衰期。

促進(jìn)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸

研究從體外、體內(nèi)兩方面探究 PD-L1 琥珀?；瘜?duì)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸的作用。體外將過(guò)表達(dá)野生型或突變型 PD-L1 的黑色素瘤細(xì)胞與活化 T 細(xì)胞共培養(yǎng)，野生型可顯著抑制 T 細(xì)胞增殖及殺傷活性，突變型則無(wú)此效。體內(nèi)構(gòu)建小鼠黑色素瘤移植瘤模型，接種過(guò)表達(dá)野生型 PD-L1 腫瘤細(xì)胞的小鼠，腫瘤生長(zhǎng)快，CD8+T 細(xì)胞浸潤(rùn)少且活性低；接種突變型的小鼠情況相反，證實(shí)其助力腫瘤細(xì)胞免疫逃逸。

營(yíng)造免疫抑制腫瘤微環(huán)境

研究人員利用流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)，野生型 PD-L1 過(guò)表達(dá)的黑色素瘤小鼠腫瘤組織中，髓源性抑制細(xì)胞（MDSCs）比例大幅上升，樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs）成熟受抑。進(jìn)一步研究揭示，PD-L1 琥珀?；险{(diào)腫瘤細(xì)胞分泌趨化因子 CCL2，招募更多 MDSCs 并抑制 DCs 成熟，營(yíng)造免疫抑制微環(huán)境。

開(kāi)發(fā)靶向治療新策略

基于上述研究，研究人員設(shè)計(jì)出特異性抑制 PD-L1 與 ITCH 相互作用、阻斷 PD-L1 琥珀酰化的小分子化合物。體外實(shí)驗(yàn)顯示，該化合物降低 PD-L1 蛋白穩(wěn)定性，增強(qiáng) T 細(xì)胞對(duì)黑色素瘤細(xì)胞的殺傷活性；體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，荷瘤小鼠使用后腫瘤生長(zhǎng)受抑制，腫瘤組織中 CD8+T 細(xì)胞增多，MDSCs 減少，DCs 成熟度提升，有望成為黑色素瘤免疫治療新策略。

四、研究亮點(diǎn)與創(chuàng)新點(diǎn)

開(kāi)拓新領(lǐng)域：首次揭示 PD-L1 琥珀酰化在腫瘤免疫中的作用

在該研究之前，雖然對(duì) PD-1/PD-L1 通路的研究已較為廣泛，但關(guān)于 PD-L1 蛋白的琥珀?；揎椉捌湓谀[瘤免疫中的功能完全未知。本文首次發(fā)現(xiàn)并證實(shí)了 PD-L1 的琥珀?；揎椖軌蛟鰪?qiáng)其蛋白穩(wěn)定性，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞免疫逃逸，為腫瘤免疫逃逸機(jī)制的研究開(kāi)拓了全新的領(lǐng)域，填補(bǔ)了該領(lǐng)域的空白。

闡明新機(jī)制：明確 PD-L1 琥珀?；揎椀恼{(diào)控網(wǎng)絡(luò)

研究詳細(xì)闡述了 PD-L1 琥珀?；揎椀恼{(diào)控機(jī)制，即琥珀酰化的 PD-L1 通過(guò)招募 ITCH 抑制自身的泛素化降解途徑。同時(shí)，發(fā)現(xiàn) PD-L1 琥珀酰化能夠通過(guò)調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中免疫細(xì)胞的組成和功能，營(yíng)造有利于腫瘤生長(zhǎng)的免疫抑制微環(huán)境。這些機(jī)制的明確為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)靶向 PD-L1 琥珀?；闹委煵呗蕴峁┝藞?jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。

探索新策略：提出靶向 PD-L1 琥珀?；闹委熜峦緩?/strong>